|
Ürün ayrıntıları:
|
| Ürün adı: | DNA ligazı | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Girdi DNA mol (pmol): | Giriş DNA(ng)/ [0.66 × Giriş DNA ortalama uzunluğu(bp)] | Başvuru: | SADECE araştırma amaçlı kullanın! |
| Vurgulamak: | 400 U/UL T4 DNA Ligaz,Araştırma T4 DNA Ligaz,T4 DNA Ligaz Biyokimyasal Reaktif |
||
Hızlı T4 DNA ligazı (400 U/µL)
Fast T4 DNA Ligazı, NGS kitaplığı oluşturma sürecinde DNA parçalarını ve adaptörü bağlamak için kullanılabilen tek bir enzim ürünüdür.Ürün, yüksek verimli sıralama ile doğrulanmıştır ve mükemmel kaliteye sahiptir.Bu enzim, MGI platformunun Ω adaptörü gibi karmaşık nükleik asit fragmanlarının bağlanması için çok uygun olan yüksek verimli bir bağlama kabiliyetine sahiptir.Sistem ayarına ihtiyaç duymayan müşteriler için çekirdek bileşeni Fast T4 DNA Ligaz olan Hieff NGSTM Ultima DNA Ligasyon Modülünün (Cat#12604) seçilmesi önerilir.
| Ürün adı | Kedi# | Boyut |
| Hızlı T4 DNA Ligazı (400 U/µL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Ürün Açıklaması hakkındaHızlı T4 DNA ligaz
Fast T4 DNA Ligazı, NGS kitaplığı oluşturma sürecinde DNA parçalarını ve adaptörü bağlamak için kullanılabilen tek bir enzim ürünüdür.Ürün, yüksek verimli sıralama ile doğrulanmıştır ve mükemmel kaliteye sahiptir.Bu enzim, MGI platformunun Ω adaptörü gibi karmaşık nükleik asit fragmanlarının bağlanması için çok uygun olan yüksek verimli bir bağlama kabiliyetine sahiptir.Hieff NGS'yi seçmeniz önerilirÇBSistem ayarına ihtiyaç duymayan müşteriler için çekirdek bileşeni Fast T4 DNA Ligaz olan Ultima DNA Ligasyon Modülü (Cat#12604).
Ürün Bileşenis ofHızlı T4 DNA ligaz
| Bileşen numarası | Bileşenler | Kedi#/Boyut | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Hızlı T4 DNA Ligazı (400 U/µL) | 100 µL | 1 ml | 4 ml |
| 10299-B | 10 × T4 DNA Ligaz Tamponu | 250 μL | 5 × 500 μL | 10 ml |
Talimatlar
1. Mevcut ana DNA kitaplığı yapım kitleri genellikle uç onarım ve A-Kuyruklama işleminden sonra saflaştırılmaz ve doğrudan adaptör ligasyonu gerçekleştirir.Lütfen reaksiyon sistemi için aşağıdaki hazırlığa bakın.İyice vorteksleyin, kısaca döndürün ve 20°C'de 15 dakika inkübe edin.
| Bileşenler | Hacim (μL) |
| dA kuyruklu DNA | 60 |
| 10 × T4 DNA Ligaz Tamponu | 10 |
| %50 PEG 6000 | 10* |
| DNA Adaptörü | X** |
| Hızlı T4 DNA Ligazı (400 U/µL) | 1-5*** |
| ddH2Ö | 100'e kadar |
[Not]:*Kit içerisinde %50 PEG 6000 bulunmaz, kendiniz hazırlamanız gerekmektedir.
**Adaptör miktarı için aşağıdaki tabloya bakın.
***MiktarıHızlıKullanılan T4 DNA Ligazı gerektiğinde 1-5 μL eklenebilir.
2. Kullanılan adaptörlerin kalitesi ve konsantrasyonu, ligasyon verimliliğini ve kitaplık verimini doğrudan etkiler.Çok fazla adaptör kullanımı daha fazla adaptör dimeri üretebilirken, daha düşük kullanım ligasyon verimliliğini ve kitaplık verimini etkileyebilir.Aşağıdaki tablo, bu kit kullanılarak farklı Giriş DNA durumlarında kullanılan önerilen adaptör miktarını listeler.
| DNA'yı girin |
Adaptör: Giriş DNA'sı (molar oran) |
DNA'yı girin |
Adaptör: Giriş DNA'sı (molar oran) |
| 1 mikrogram | 10:1 | 50 ng | 100:1 |
| 500 ng | 20:1 | 25 ng | 200:1 |
| 250 ng | 40:1 | 1 ng | 200:1 |
| 100 ng | 100:1 | 500 sayfa | 400:1 |
[Not]: Giriş DNA mol (pmol)≈ Giriş DNA(ng)/ [0.66 × Giriş DNA ortalama uzunluk(bp)].
Aşama 1: Girilen DNA'nın mol sayısını hesaplayın.Formül: Girdi DNA mol (pmol)≈ Girdi DNA(ng)/ [0.66 × Girdi DNA ortalama uzunluk(bp)];Girdi DNA mol (pmol)=100 ÷ (0.66×300) = 0.5 pmol;
Adım 2: Yukarıdaki tabloya göre, eklenen adaptörün mol sayısını hesaplayın.;Giriş DNA'sı 100ng olduğunda, bağdaştırıcıların molar oranı: giriş DNA'sı 100:1'dir ve eklenen bağdaştırıcıların mol sayısı=100×0.5 pmol=50 pmol;
Aşama 3: Adaptör ekleme hacmini hesaplayın.Adaptör konsantrasyonu = 15 μmol/L (başka bir şirketin adaptörünü kullanıyorsanız, konsantrasyonunu talimatlarına göre belirlemeniz gerekir);Eklenen adaptör hacmi = eklenen adaptör mol (50 pmol) ÷ adaptör konsantrasyonu (15 μmol/L) = 3,34 μL (Not: 15 μmol/L = 15 pmol/ μL);
Özetle, adaptörün eklenebileceği hacim 3.4 μL'dir.(Not: Adaptörün maksimum ekleme hacmi 5 μL'yi geçmez).
Ürün buz paketleri ile sevk edilir ve -20°C'de iki yıl saklanabilir.
Birim Tanımı
20 μL'lik bir ligasyon reaksiyon sisteminde, 6 μg λDNA-Hind Ⅲ 16°C'de 30 dakika reaksiyona girdiğinde, DNA fragmanlarının %50'den fazlasını ligasyonu vermek için gereken enzim miktarı bir birim (U) olarak tanımlandı.
Uyarılar
1. T4 DNA Ligaz, fiziksel denatürasyona duyarlıdır.Karıştırırken tüpü yavaşça ters çevirin ve iyice çalkalayın.Şiddetle sallamayın;
2. Enzimler, kullanıldıklarında bir buz kutusunda veya buz banyosunda saklanmalı ve kullanımdan hemen sonra -20°C'de saklanmalıdır;
3.Bu ürün SADECE araştırma amaçlıdır!
4.Güvenliğiniz ve sağlığınız için lütfen ameliyat için laboratuvar önlüğü ve tek kullanımlık eldivenler giyin.
Bu Fast T4 DNA ligazı (400 U/µL) hakkında daha fazla bilgiye ihtiyacınız varsa, lütfen bizimle iletişime geçin, teşekkür ederim
İlgili kişi: Ms Kris
Tel: +8613049739311
